ПТР өнімдерін тазартудың басқа әдістері бар ма?
ПТР өнімдерін тазартудың басқа әдістері бар ма?

Бейне: ПТР өнімдерін тазартудың басқа әдістері бар ма?

Бейне: ПТР өнімдерін тазартудың басқа әдістері бар ма?
Бейне: Мына белгілер сізде болса, ағзаңыз Шлакка толып тұрғанын білдіреді | Ағзаны шлактан тазалау жолдары 2024, Қараша
Anonim

Қажетті қолданбалар үшін ПТР тазалау немесе тексеру ПТР нәтижелер, Ана жерде екеуі әдістері әдетте орындалады: ПТР өнімі колонканы және гельді қолданып оқшаулау тазарту агарозды гельден.

Мұнда ПТР өнімдерін тазарту үшін хроматографияның қандай түрі қолданылады?

ПТР өнімдерін тазарту үшін өлшемді алып тастау хроматографиясы қолданылады. Бұл ақуыз сияқты шағын молекулаларды, праймерлер , және нуклеотидтер, ал ПТР өнімдері сияқты үлкен молекулалар моншақтарға кіріп, баған арқылы жинау түтіктеріне өту үшін тым үлкен.

Сондай-ақ, ДНҚ-ны қалай тазартуға болады? Негізінде, сіз аласыз тазарту сіздің ДНҚ үлгілерді ең қолайлы процедураны (механикалық бұзу, химиялық өңдеу немесе ферментативті қорыту) пайдаланып, оның ластаушы заттарынан нуклеин қышқылдарын бөліп алу және оны қолайлы буферлік ерітіндіде тұндыру арқылы жасуша және/немесе тін үлгілерін лизациялау.

Сонымен қатар, біз неліктен ПТР өнімін тазартамыз?

Тазарту а-дан алынған ДНҚ ПТР реакция әдетте төменгі ағынды пайдалану үшін қажет және ферменттерді, нуклеотидтерді, праймерлерді және буфер компоненттерін жоюды жеңілдетеді. Жиі қолданылатын әдістер хаотропты тұздардың қатысуымен ДНҚ таңдамалы түрде байланысатын кремний диоксиді матрицасы бар спин бағандарын пайдаланады.

Неліктен ДНҚ тазартылуы керек?

Біз таза жоғары ДНҚ буферлік тұздарды, ферменттерді немесе төменгі ағындағы қолданбаларға әсер етуі мүмкін басқа заттарды жою үшін сулы ерітінділерден. Мысалдарға ПТР реакциясы жатады таза жоғары, таза дейін шектеу дайджест кейін және таза геномдық немесе плазмидадан тұрады ДНҚ жасушалық ақуыздармен/қоқыспен ластанған.

Ұсынылған: