Мазмұны:

Гель электрофорезін қалай жүктейсіз?
Гель электрофорезін қалай жүктейсіз?

Бейне: Гель электрофорезін қалай жүктейсіз?

Бейне: Гель электрофорезін қалай жүктейсіз?
Бейне: Физиотерапия. Электрофорез. 2024, Желтоқсан
Anonim

Үлгілерді жүктеу және агароза гелін іске қосу:

  1. қосу жүктеу ДНҚ үлгілерінің әрқайсысына буфер.
  2. Қатты болғаннан кейін агарозды салыңыз гель ішіне гель қорап ( электрофорез бірлік).
  3. Толтыру гель дейін 1xTAE (немесе TBE) бар қорапты гель қамтылған.
  4. Мұқият жүк бірінші жолағына молекулалық салмақ баспалдақ гель .

Осыған байланысты гельдік электрофорез үшін қанша ДНҚ жүктеу керек?

сомасы Жүктеу үшін ДНҚ ұңғымаға шаққанда өзгермелі. Ең аз мөлшері ДНҚ этидум бромидімен анықтауға болатын 10 нг құрайды. ДНҚ бір ұңғымаға 100 нг дейінгі сомалардың әсерінен этидиум бромидінде боялған өткір, таза жолақ пайда болады. гель.

Сонымен қатар, неліктен гельдік электрофорезде судың орнына буфер қолданылады? The буфер ДНҚ ерітіндісінің рН мәнін бейтарап деңгейге жақын ұстау үшін қажет, өйткені ол электролиз арқылы қышқыл болуы мүмкін. Электродтар тудыратын токтар тудыруы мүмкін су молекулалар Н+ иондарын диссоциациялайды және босатады.

Адамдар сонымен қатар гельдік электрофорезде маркер неліктен қолданылады?

Кішкентай фрагменттер үлкен фрагменттерге қарағанда жылдамырақ қозғалады, демек, олар жылан арқылы өтеді гель . Маркер не үшін қолданылады арқылы фрагменттерді жүргізгенде гель ? А маркер белгілі өлшемдегі ДНҚ фрагменттерін қамтиды. Маркерлер әрқайсысында іске асырылады гель басқалардағы белгісіз фрагменттермен салыстыру үшін гель жолақтар.

Агарозды гельде қанша ДНҚ көруге болады?

Көпшілігі агарозды гельдер 0,7%-дан 2%-ға дейін жасалады. 0,7% гель болады үлкенді жақсы ажыратуды (разрядтылығын) көрсетіңіз ДНҚ фрагменттері (5–10 кб) және 2% гель болады шағын фрагменттер үшін жақсы ажыратымдылықты көрсетіңіз (0,2–1 кб).

Ұсынылған: